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2020藥典方法提高|復方鹽酸阿替卡因注射液的分析:腎上腺素的分析
更新時間:2018-12-20   點擊次數:2539次

 

復方鹽酸阿替卡因注射液的分析

腎上腺素的分析

CAPCELL PAK C18 MGII

復方鹽酸阿替卡因注射液為復方制劑,是鹽酸阿替卡因腎上腺素的滅菌水溶液,作為口腔用局部麻醉劑,適用于涉及切骨術及粘膜切開的外科手術過程。

 

鹽酸阿替卡因

Articaine hydrochloride

M.W. : 320.84

腎上腺素

L(-)-Epinephrine

M.W. : 183.2  

 

客戶提供了復方鹽酸阿替卡因注射液,鹽酸阿替卡因、腎上腺素及亞硫酸腎上腺素對照品,希望本實驗室選擇合適的色譜柱及色譜條件,對注射液中鹽酸阿替卡因和腎上腺素進行分析。

 

國家藥品標準(YBH17082004-2015)中,在對復方鹽酸阿替卡因注射液中腎上腺素進行分析時,使用甲醇-水進行梯度洗脫,但由于腎上腺素極性較強,即使初始梯度為純水相條件,腎上腺素仍緊鄰死時間出峰,保留不佳,易受到溶劑峰干擾,無法進行準確定量。

 

本實驗室嘗試使用能夠在純水條件下穩定使用的高極性色譜柱CAPCELL PAK C18 AQ柱,和鍵合金剛烷基的高表面極性色譜柱CAPCELL PAK ADME分別進行分析,均無法得到理想的保留。

 

進而,我們分別嘗試使用反相C18離子對試劑,以及直接使用離子交換色譜柱兩種方式,分別對腎上腺素進行保留分析。

 

首先,仍然使用鹽酸阿替卡因分析中應用到的CAPCELL PAK家族“選擇”——中等極性色譜柱CAPCELL PAK C18 MGII,并在流動相中添加離子對試劑對腎上腺素進行分析。

 

如圖1,對腎上腺素對照品溶液進行分析,腎上腺素主峰保留時間為5.69 min,拖尾因子為1.19,理論塔板數為12538。

 

 

在相同色譜條件下,嘗試對亞硫酸腎上腺素標準品及注射液中的亞硫酸腎上腺素進行分析。

 

如圖3,注射液中未明顯見亞硫酸腎上腺素出峰,亞硫酸腎上腺素標準品溶液能夠得到良好分析結果,保留時間為3.55min,拖尾因子為1.14,理論塔板數為14955。

考慮到使用離子對試劑的流動相條件具有流動相配制麻煩、有損色譜柱壽命、平衡時間長等缺點,我們也嘗試使用鍵合磺酸基團的強陽離子交換柱——CAPCELL PAK SCX進行分析,在流動相中添加磷酸二氫銨,通過對鹽濃度進行調整,終,如圖4,在5 mmol/L磷酸二氫銨(磷酸調pH=2.5)條件下,亞硫酸腎上腺素保留時間為3.32 min,然而出現峰形拖尾現象,拖尾因子為2.0,不如CAPCELL PAK C18 MGII色譜柱添加離子對試劑所得分析結果好。

 

綜上實驗結果,使用中等極性色譜柱CAPCELL PAK C18 MGII S5 4.6 mm i.d. × 250 mm,在流動相中添加5 mM辛烷磺酸鈉、30°C柱溫條件下進行梯度洗脫,能夠實現復方鹽酸阿替卡因注射液中腎上腺素和亞硫酸腎上腺素的良好保留與分析。

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